埃尔·列维斯和威利·克拉克是歌舞杂耍界著名的喜剧明星搭档，但舞台下，两人已经超过二十年没有说过话了。原来他们两人因为一些私事而交恶，谁也不肯低头。而克拉克的侄子理查德·本杰明为了给自己工作的电视台制作一档特别的电视节目，想邀请已经多年没有合作的列维斯和克拉克再次携手复出。但已经多年没有来往的昔日老友如何才能在电视机前重温往日的嬉笑情景呢。在本杰明的努力下，两人终于同意再次合作，但完成节目也没有想象中的那么容易。

一个在平民窟中长大的男孩被指控谋杀生父，旁观者和凶器均以呈堂铁证如山。担任此案陪审团的12个人要与案件结案前在陪审团休息室里讨论案情，并要一直通过讨论结果，才能正式结案。十二个人各有自己的职业也生活，他们当中有巧舌如簧的广告商、仗义执言的工程师、毫无见地的富家子、歧视平民的新贵族、性情暴躁的老警察、精明冷静的银行家、只赶时间的推销员。每个人都有自己思考和说话的方式，但是除了亨利·方达扮演的工程师之外，其余的人都对这个案子不屑一顾，在还未进行讨论之前就早早认定男孩就是杀人凶手。最终通过了各种不同人生观的冲突，各种思维方式的较量，所有的陪审团员都负责任地投出了自己神圣的一票。